上海篤瑪生物科技有限公司人(Human)硫酸酯酶2(SULF2) ELISA檢測(cè)試劑盒本試劑盒只能用于科學(xué)研究,不得用于醫(yī)學(xué)診斷商品貨號(hào):DM6987產(chǎn)品規(guī)格:48T/96T檢測(cè)范圍:反應(yīng)性:Human檢測(cè)范圍:3.65-225U/ml靈敏度: 1.0 U/ml檢測(cè)原理:試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)。往 預(yù)先包被硫酸酯酶2(SULF2)抗體的包被微孔中,依次加入標(biāo)本、 標(biāo)準(zhǔn)品、 HRP標(biāo)記的檢測(cè)抗體,經(jīng)過(guò)溫育并徹底洗滌。用底物TMB 顯色,TMB在過(guò)氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn) 化成*終的黃色。顏色的深淺和樣品中的硫酸酯酶2(SULF2)呈正 相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm 波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度(OD 值),計(jì)算樣品 活性。樣品收集、存儲(chǔ)及保存方法:1. 血清:使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管,操作過(guò)程中避免任何細(xì)胞 刺激,收集血液后,3000 轉(zhuǎn)離心 10 分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心 地分離。2. 血漿:EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000 轉(zhuǎn)離心 30 分鐘取上 清。3. 細(xì)胞上清液:3000 轉(zhuǎn)離心 10 分鐘去除顆粒和聚合物。4. 組織勻漿:將組織加入適量生理鹽水搗碎。 3000 轉(zhuǎn)離心 10 分 鐘取上清。5. 保存:如果樣本收集后不及時(shí)檢測(cè),請(qǐng)按一次用量分裝,凍存于 -20℃ , 避免反復(fù)凍融,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。自備物品:1. 酶標(biāo)儀(450nm)2. 高 精 度 加 樣 器 及 槍 頭 : 0.5-10uL 、 2-20uL 、 20-200uL 、200-1000uL3. 37℃恒溫箱操作注意事項(xiàng):1. 試劑盒保存在 2-8℃ , 使用前室溫平衡 20 分鐘。從冰箱取出的濃 縮洗滌液會(huì)有結(jié)晶,這屬于正常現(xiàn)象,水浴加熱使結(jié)晶完全溶解后 再使用。2. 實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回自封袋中,密封(低溫干燥)保存。 3. 濃度為 0 的 S0 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品即可視為陰性對(duì)照或者空白;按照說(shuō)明 書操作時(shí)樣本已經(jīng)稀釋 5 倍,*終結(jié)果乘以 5 才是樣本實(shí)際濃度。4. 嚴(yán)格按照說(shuō)明書中標(biāo)明的時(shí)間、加液量及順序進(jìn)行溫育操作。5. 所有液體組分使用前充分搖勻。試劑盒組成:名稱96 孔配置48 孔配置備注微孔酶標(biāo)板12 孔×8 條12 孔 ×4 條無(wú)標(biāo)準(zhǔn)品0.3mL*6 管0.3mL*6 管無(wú)樣本稀釋液6mL3mL無(wú)檢測(cè)抗體-HRP10mL5mL無(wú)20 ×洗滌緩沖液25mL15mL按說(shuō)明書進(jìn)行稀釋底物 A6mL3mL無(wú)底物 B6mL3mL無(wú)終止液6mL3mL無(wú)封板膜2 張2 張無(wú)說(shuō)明書1 份1 份無(wú)自封袋1 個(gè)1 個(gè)無(wú)注:標(biāo)準(zhǔn)品( S0-S5)濃度依次為:0、 12.5、25、 50、 100、200 ng/mL試劑的準(zhǔn)備:20×洗滌緩沖液的稀釋:蒸餾水按 1:20 稀釋,即 1 份的 20×洗滌 緩沖液加 19 份的蒸餾水。洗板方法:1. 手工洗板:甩盡孔內(nèi)液體,每孔加滿洗滌液,靜置 1min 后甩盡 孔內(nèi)液體,在吸水紙上拍干,如此洗板 5 次。2. 自動(dòng)洗板機(jī):每孔注入洗液 350μL,浸泡 1min,洗板 5 次。結(jié)果判斷:繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線:在 Excel 工作表中,以標(biāo)準(zhǔn)品濃度作橫坐標(biāo),對(duì)應(yīng) OD 值作縱坐標(biāo),繪制出標(biāo)準(zhǔn)品線性回歸曲線,按曲線方程計(jì)算各樣 本濃度值。注:此圖片僅供參考試劑盒性能:1. 準(zhǔn)確性:標(biāo)準(zhǔn)品線性回歸與預(yù)期濃度相關(guān)系數(shù) R 值,大于等于 0.9900。2. 靈敏度:*低檢測(cè)濃度小于 1.0 ng/mL。3. 特異性:不與其它可溶性結(jié)構(gòu)類似物交叉反應(yīng)。4. 重復(fù)性:板內(nèi)、板間變異系數(shù)均小于 15%。5. 貯藏:2-8℃ , 避光防潮保存。6. 有效期:6 個(gè)月操作步驟:1. 從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條,剩余板條用自封袋密封放回4℃。2. 設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔,標(biāo)準(zhǔn)品孔各加不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)品50μL;3. 樣本孔先加待測(cè)樣本10μL,再加樣本稀釋液40μL;空白孔不加。4. 除空白孔外,標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔中每孔加入辣根過(guò)氧化物酶(HRP)標(biāo)記的檢測(cè)抗體100μL,用封板膜封住反應(yīng)孔,37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。5. 棄去液體,吸水紙上拍干,每孔加滿洗滌液,靜置1min,甩去洗滌液,吸水紙上拍干,如此重復(fù)洗板5次(也可用洗板機(jī)洗板)。6. 每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。7. 每孔加入終止液50μL,15min內(nèi),在450nm波長(zhǎng)處測(cè)定各孔的OD值。技術(shù)支持:電話:400-9681786電子郵件:dm_support@sina.com網(wǎng)址:www.lchccm.cn生產(chǎn)廠家:上海篤瑪生物科技有限公司免責(zé)聲明:1. 試劑盒僅供研究使用,不得用于臨床實(shí)驗(yàn)或人體實(shí)驗(yàn),否則所 產(chǎn)生的一切后果,由實(shí)驗(yàn)者承擔(dān),本公司概不負(fù)責(zé)。2. 嚴(yán)格按照說(shuō)明書操作,實(shí)驗(yàn)者違反說(shuō)明書操作,后果由實(shí)驗(yàn)者 承擔(dān)
上海篤瑪生物科技有限公司人跨膜蛋白 212ELISA 檢測(cè)試劑盒Human Transmembrane Protein 212 ELISA Detection Kit本試劑盒只能用于科學(xué)研究,不得用于醫(yī)學(xué)診斷商品貨號(hào):DM6986產(chǎn)品規(guī)格:48T/96T檢測(cè)范圍:反應(yīng)性:Human檢測(cè)范圍:17.45-886 ng/mL 靈敏度: 1.0 U/ml檢測(cè)原理:試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)。往 預(yù)先包被跨膜蛋白212(TMEM212)抗體的包被微孔中,依次加入 標(biāo)本、標(biāo)準(zhǔn)品、 HRP標(biāo)記的檢測(cè)抗體,經(jīng)過(guò)溫育并徹底洗滌。用底 物TMB顯色,TMB在過(guò)氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作 用下轉(zhuǎn)化成*終的黃色 。 顏色的深淺和樣品中的跨膜蛋白212 ( TMEM212 )呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm 波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度 ( OD 值),計(jì)算樣品濃度。樣品收集、存儲(chǔ)及保存方法:1. 血清:使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管,操作過(guò)程中避免任何細(xì)胞 刺激,收集血液后,3000 轉(zhuǎn)離心 10 分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心 地分離。2. 血漿:EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000 轉(zhuǎn)離心 30 分鐘取上 清。3. 細(xì)胞上清液:3000 轉(zhuǎn)離心 10 分鐘去除顆粒和聚合物。4. 組織勻漿:將組織加入適量生理鹽水搗碎。 3000 轉(zhuǎn)離心 10 分 鐘取上清。5. 保存:如果樣本收集后不及時(shí)檢測(cè),請(qǐng)按一次用量分裝,凍存于 -20℃ , 避免反復(fù)凍融,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。自備物品:1. 酶標(biāo)儀(450nm)2. 高 精 度 加 樣 器 及 槍 頭 : 0.5-10uL 、 2-20uL 、 20-200uL 、200-1000uL3. 37℃恒溫箱操作注意事項(xiàng):1. 試劑盒保存在 2-8℃ , 使用前室溫平衡 20 分鐘。從冰箱取出的濃 縮洗滌液會(huì)有結(jié)晶,這屬于正常現(xiàn)象,水浴加熱使結(jié)晶完全溶解后 再使用。2. 實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回自封袋中,密封(低溫干燥)保存。 3. 濃度為 0 的 S0 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品即可視為陰性對(duì)照或者空白;按照說(shuō)明 書操作時(shí)樣本已經(jīng)稀釋 5 倍,*終結(jié)果乘以 5 才是樣本實(shí)際濃度。4. 嚴(yán)格按照說(shuō)明書中標(biāo)明的時(shí)間、加液量及順序進(jìn)行溫育操作。5. 所有液體組分使用前充分搖勻。試劑盒組成:名稱96 孔配置48 孔配置備注微孔酶標(biāo)板12 孔×8 條12 孔 ×4 條無(wú)標(biāo)準(zhǔn)品0.3mL*6 管0.3mL*6 管無(wú)樣本稀釋液6mL3mL無(wú)檢測(cè)抗體-HRP10mL5mL無(wú)20 ×洗滌緩沖液25mL15mL按說(shuō)明書進(jìn)行稀釋底物 A6mL3mL無(wú)底物 B6mL3mL無(wú)終止液6mL3mL無(wú)封板膜2 張2 張無(wú)說(shuō)明書1 份1 份無(wú)自封袋1 個(gè)1 個(gè)無(wú)注:標(biāo)準(zhǔn)品( S0-S5)濃度依次為:0、 12.5、25、 50、 100、200 ng/mL試劑的準(zhǔn)備:20×洗滌緩沖液的稀釋:蒸餾水按 1:20 稀釋,即 1 份的 20×洗滌 緩沖液加 19 份的蒸餾水。洗板方法:1. 手工洗板:甩盡孔內(nèi)液體,每孔加滿洗滌液,靜置 1min 后甩盡 孔內(nèi)液體,在吸水紙上拍干,如此洗板 5 次。2. 自動(dòng)洗板機(jī):每孔注入洗液 350μL,浸泡 1min,洗板 5 次。結(jié)果判斷:繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線:在 Excel 工作表中,以標(biāo)準(zhǔn)品濃度作橫坐標(biāo),對(duì)應(yīng) OD 值作縱坐標(biāo),繪制出標(biāo)準(zhǔn)品線性回歸曲線,按曲線方程計(jì)算各樣 本濃度值。注:此圖片僅供參考試劑盒性能:1. 準(zhǔn)確性:標(biāo)準(zhǔn)品線性回歸與預(yù)期濃度相關(guān)系數(shù) R 值,大于等于 0.9900。2. 靈敏度:*低檢測(cè)濃度小于 1.0 ng/mL。3. 特異性:不與其它可溶性結(jié)構(gòu)類似物交叉反應(yīng)。4. 重復(fù)性:板內(nèi)、板間變異系數(shù)均小于 15%。5. 貯藏:2-8℃ , 避光防潮保存。6. 有效期:6 個(gè)月操作步驟:1. 從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條,剩余板條用自封袋密封放回4℃。2. 設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔,標(biāo)準(zhǔn)品孔各加不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)品50μL;3. 樣本孔先加待測(cè)樣本10μL,再加樣本稀釋液40μL;空白孔不加。4. 除空白孔外,標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔中每孔加入辣根過(guò)氧化物酶(HRP)標(biāo)記的檢測(cè)抗體100μL,用封板膜封住反應(yīng)孔,37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。5. 棄去液體,吸水紙上拍干,每孔加滿洗滌液,靜置1min,甩去洗滌液,吸水紙上拍干,如此重復(fù)洗板5次(也可用洗板機(jī)洗板)。6. 每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。7. 每孔加入終止液50μL,15min內(nèi),在450nm波長(zhǎng)處測(cè)定各孔的OD值。技術(shù)支持:電話:400-9681786電子郵件:dm_support@sina.com網(wǎng)址:www.lchccm.cn生產(chǎn)廠家:上海篤瑪生物科技有限公司免責(zé)聲明:1. 試劑盒僅供研究使用,不得用于臨床實(shí)驗(yàn)或人體實(shí)驗(yàn),否則所 產(chǎn)生的一切后果,由實(shí)驗(yàn)者承擔(dān),本公司概不負(fù)責(zé)。2. 嚴(yán)格按照說(shuō)明書操作,實(shí)驗(yàn)者違反說(shuō)明書操作,后果由實(shí)驗(yàn)者 承擔(dān)
本試劑盒只能用于科學(xué)研究,不得用于醫(yī)學(xué)診斷 人(Human)N-乙酰轉(zhuǎn)移酶 10(NAT-10) ELISA 檢測(cè)試劑盒使用說(shuō)明書檢測(cè)原理試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)。往 預(yù)先包被N-乙酰轉(zhuǎn)移酶10(NAT-10)抗體的包被微孔中,依次加入 標(biāo)本、標(biāo)準(zhǔn)品、HRP標(biāo)記的檢測(cè)抗體,經(jīng)過(guò)溫育并徹底洗滌。用底物 TMB顯色,TMB在過(guò)氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下 轉(zhuǎn)化成*終的黃色。顏色的深淺和樣品中的N-乙酰轉(zhuǎn)移酶10(NAT-10)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm 波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度(OD 值), 計(jì)算樣品活性。樣品收集、處理及保存方法1. 血清:使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管,操作過(guò)程中避免任何細(xì) 胞刺激,收集血液后,3000 轉(zhuǎn)離心 10 分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心 地分離。 2. 血漿:EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000 轉(zhuǎn)離心 30 分鐘取上清。 3. 細(xì)胞上清液:3000 轉(zhuǎn)離心 10 分鐘去除顆粒和聚合物。 4. 組織勻漿:將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000 轉(zhuǎn)離心 10 分鐘 取上清。 5. 保存:如果樣本收集后不及時(shí)檢測(cè),請(qǐng)按一次用量分裝,凍存 于-20℃,避免反復(fù)凍融,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。自備物品1. 酶標(biāo)儀(450nm) 2. 高精度加樣器及槍頭:0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL 3. 37℃恒溫箱操作注意事項(xiàng)1. 試劑盒保存在 2-8℃,使用前室溫平衡 20 分鐘。從冰箱取出的 濃縮洗滌液會(huì)有結(jié)晶,這屬于正?,F(xiàn)象,水浴加熱使結(jié)晶完全溶解 后再使用。 2. 實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回自封袋中,密封(低溫干燥)保 存。 3. 濃度為 0 的 S0 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品即可視為陰性對(duì)照或者空白;按照說(shuō)明 書操作時(shí)樣本已經(jīng)稀釋 5 倍,*終結(jié)果乘以 5 才是樣本實(shí)際濃度。 4. 嚴(yán)格按照說(shuō)明書中標(biāo)明的時(shí)間、加液量及順序進(jìn)行溫育操作。 5. 所有液體組分使用前充分搖勻。試劑盒組成 名稱 96 孔配置 48 孔配置 備注微孔酶標(biāo)板 12 孔×8 條 12 孔×4 條 無(wú) 標(biāo)準(zhǔn)品 0.3mL*6 管 0.3mL*6 管 無(wú) 樣本稀釋液 6mL 3mL 無(wú) 檢測(cè)抗體-HRP 10mL 5mL 無(wú) 20×洗滌緩沖液 25mL 15mL 按說(shuō)明書進(jìn)行稀釋 底物 A 6mL 3mL 無(wú) 底物 B 6mL 3mL 無(wú) 終止液 6mL 3mL 無(wú) 封板膜 2 張 2 張 無(wú) 說(shuō)明書 1 份 1 份 無(wú) 自封袋 1 個(gè) 1 個(gè) 無(wú) 注:標(biāo)準(zhǔn)品(S0-S5)濃度依次為:0、25、50、100、200、400 U/L試劑的準(zhǔn)備20×洗滌緩沖液的稀釋:蒸餾水按 1:20 稀釋,即 1 份的 20×洗滌 緩沖液加 19 份的蒸餾水。洗板方法1. 手工洗板:甩盡孔內(nèi)液體,每孔加滿洗滌液,靜置 1min 后甩盡 孔內(nèi)液體,在吸水紙上拍干,如此洗板 5 次。 2. 自動(dòng)洗板機(jī):每孔注入洗液 350μL,浸泡 1min,洗板 5 次。操作步驟1. 從室溫平衡 20min 后的鋁箔袋中取出所需板條,剩余板條用自 封袋密封放回 4℃。 2. 設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔,標(biāo)準(zhǔn)品孔各加不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)品 50μ L; 3. 樣本孔先加待測(cè)樣本 10μL,再加樣本稀釋液 40μL;空白孔不 加。 4. 除空白孔外,標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔中每孔加入辣根過(guò)氧化物酶 (HRP)標(biāo)記的檢測(cè)抗體 100μL,用封板膜封住反應(yīng)孔,37℃水浴鍋 或恒溫箱溫育 60min。 5. 棄去液體,吸水紙上拍干,每孔加滿洗滌液,靜置 1min,甩去 洗滌液,吸水紙上拍干,如此重復(fù)洗板 5 次(也可用洗板機(jī)洗板)。 6. 每孔加入底物 A、B 各 50μL,37℃避光孵育 15min。 7. 每孔加入終止液 50μL,15min 內(nèi),在 450nm 波長(zhǎng)處測(cè)定各孔的 OD 值。結(jié)果判斷繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線:在 Excel 工作表中,以標(biāo)準(zhǔn)品濃度作橫坐標(biāo),對(duì)應(yīng) OD 值作縱坐標(biāo),繪制出標(biāo)準(zhǔn)品線性回歸曲線,按曲線方程計(jì)算各樣 本濃度值。
用于動(dòng)力觀察,菌種保存,H 抗原位相變異試驗(yàn)成分(g/L) :蛋白胨 10.0牛肉浸粉 3.0瓊脂 4.0氯化鈉 5.0pH值7.4 ± 0.1 25℃用法:稱取本品 22.0g ,加熱溶解于 1000ml 蒸餾水中,煮沸溶解,分裝小試管,121℃高壓滅菌 15 分鐘,直立凝固,備用。
人α-乳白蛋白ELISA試劑盒 概述:ELISA(酶聯(lián)免疫吸附檢測(cè))是一種平板檢測(cè)技術(shù),旨在檢測(cè)和定量肽、蛋白質(zhì)、抗體和激素等物質(zhì)。其他名稱,比如酶 免疫測(cè)定(EIA)也用于描述該的技術(shù)。在 ELISA 中,抗原必須固定化到固體表面,然后與連接到酶的抗體混合。通過(guò) 與適當(dāng)?shù)牡孜锓跤?,測(cè)量報(bào)告基因酶的活性來(lái)產(chǎn)生可測(cè)量的產(chǎn)物,從而實(shí)現(xiàn)檢測(cè)。該檢測(cè)策略中的*關(guān)鍵元素是高度特 異性的抗體-抗原相互作用。 ELISA試劑盒的特點(diǎn)有:一、高效、靈敏、特異的抗體二、節(jié)省實(shí)驗(yàn)經(jīng)費(fèi)三、吸附性能好,空白值低,孔底透明度高的固相載體四、適用血清、血漿、組織勻漿液、細(xì)胞培養(yǎng)上清液、尿液等等多種標(biāo)本類型五、穩(wěn)定的重復(fù)性和可靠性 ELISA 試劑盒主要保證規(guī)格概述規(guī)格 描述這些對(duì)您的好處是?標(biāo)準(zhǔn)品校準(zhǔn)校準(zhǔn)符合國(guó)家生物標(biāo)準(zhǔn)和控制研究所 (NIBSC) 標(biāo)準(zhǔn) (如可用)可在多個(gè)平臺(tái)上實(shí)現(xiàn)準(zhǔn)確定量和一致的參考標(biāo)準(zhǔn)精度板間 CV <10%<10% 的平均板內(nèi) CV獲得一致的結(jié)果稀釋線性度檢測(cè)范圍內(nèi)的線性結(jié)果可準(zhǔn)確定量連續(xù)稀釋樣品平行性重組蛋白標(biāo)準(zhǔn)品模擬天然蛋白可靠地檢測(cè)樣品回收率緩沖液經(jīng)過(guò)優(yōu)化,可*大限度減少基質(zhì)效應(yīng)有助于確保對(duì)血清和血漿等復(fù)雜基質(zhì)內(nèi)的樣品進(jìn)行準(zhǔn)確定量分析靈敏度針對(duì)特定檢測(cè)類型檢測(cè)相關(guān)水平的蛋白實(shí)現(xiàn)低水平蛋白檢測(cè)特異性使用類似分析物進(jìn)行交叉反應(yīng)性測(cè)試幫助確保準(zhǔn)確測(cè)量目標(biāo)蛋白質(zhì)批次間一致性對(duì)內(nèi)部控制進(jìn)行測(cè)試,以評(píng)估數(shù)據(jù)是否在設(shè)定范圍內(nèi)有助于確保新批次獲得一致的結(jié)果 檢測(cè)內(nèi)精度檢測(cè)內(nèi)驗(yàn)證顯示檢測(cè)板內(nèi)孔間的重現(xiàn)性。檢測(cè)內(nèi)驗(yàn)證產(chǎn)生的數(shù)據(jù)有助于確保在板的不同孔中檢測(cè)的樣品給出可比較結(jié)果。以下是為具有代表性的板內(nèi)驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)生成和報(bào)告的數(shù)據(jù)示例。在本示例中, 通過(guò)在同一檢測(cè)中檢測(cè)三個(gè)樣品各重復(fù) 14 次來(lái)評(píng)估 Invitrogen VCAM-1 人 ELISA 試劑盒。每個(gè)樣品的 %CV 表明該檢測(cè)具有良好的重現(xiàn)性。具有已知 Hu sVCAM-1 濃度的樣品重復(fù)檢測(cè)14 次,以確定檢測(cè)的精度。參數(shù)樣品 1樣品 2樣品 3平均值(ng/mL)1.234.3318.59標(biāo)準(zhǔn)差0.060.331.43變異系數(shù) (%CV)4.857.627.68檢測(cè)間精度檢測(cè)間精度顯示不同日期進(jìn)行的檢測(cè)間重現(xiàn)性。檢測(cè)間精度通常為< 10%。這確保獲得的結(jié)果隨著時(shí)間的推移和試劑盒之間保持一致。以下是為檢測(cè)間精度生成和報(bào)告的典型數(shù)據(jù)示例。在該示例中, 使用 Invitrogen 淀粉樣蛋白 β 42 人 ELISA 試劑盒在多天內(nèi)檢測(cè)三份樣品,共檢測(cè) 36 次。結(jié)果顯示變異系數(shù)小于 10%,從而證明了檢測(cè)間良好再現(xiàn)性。參數(shù)樣品 1樣品 2樣品 3平均值(ng/mL)71.3040.1621.29標(biāo)準(zhǔn)差5.243.961.13Coefficient of Variation (% CV)7.369.855.32稀釋線性度線性是相對(duì)于基于標(biāo)準(zhǔn)曲線的分析物計(jì)算量來(lái)定義。樣品中分析物的*終計(jì)算濃度應(yīng)與檢測(cè)定量范圍內(nèi)的任何稀釋濃度相同。開發(fā)完善的免疫檢測(cè)試劑盒可*大限度地減少不同樣品基質(zhì)和其他可能干擾的因素的潛在影響。稀釋線性驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)提供了關(guān)于在不同稀釋水平下測(cè)試的樣品結(jié)果精度的信息。對(duì)每種經(jīng)驗(yàn)證樣品類型進(jìn)行稀釋線性測(cè)試,如果結(jié)果是每種稀釋預(yù)期濃度的 70%-130%,則視為良好。線性對(duì)于在測(cè)定的動(dòng)態(tài)范圍內(nèi)準(zhǔn)確測(cè)量分析物濃度非常重要,可使用公式計(jì)算:% 線性度 = (稀釋后測(cè)量濃度 / 預(yù)期濃度) x 100特定樣品類型的稀釋線性度通常如下表所示。在該示例中, 使用 HeLa 細(xì)胞裂解物評(píng)價(jià) Invitrogen c-Myc (總) 人 ELISA 試劑盒。在檢測(cè)的動(dòng)態(tài)范圍內(nèi),用試劑盒隨附的標(biāo)準(zhǔn)稀釋緩沖液稀釋 HeLa 細(xì)胞裂解物。測(cè)量值與預(yù)期值顯示出良好的檢測(cè)線性,并且沒(méi)有來(lái)自樣品基質(zhì)的明顯干擾。HeLa 細(xì)胞在 37°C 下,含有 10% 胎牛血清 (FBS) 的 DMEM 中生長(zhǎng),并用 細(xì)胞提取緩沖液裂解,并進(jìn)行超聲處理。將該裂解物在標(biāo)準(zhǔn)稀釋緩沖液中稀釋至檢測(cè)范圍,并測(cè)量 c-Myc(總量)。檢測(cè)結(jié)果與預(yù)期濃度的線性回歸檢測(cè)產(chǎn)生的相關(guān)系數(shù)為0.99。細(xì)胞裂解物稀釋測(cè)量值(pg/mL)預(yù)期值(pg/mL)% 線性1/10372.3372.31001/20205.7186.141111/40117.293.11261/8056.046.541201/16025.823.31111/3208.811.676ELISA 平行性平行性提供了在給定 ELISA 中以相同方式檢測(cè)天然和重組樣品的確認(rèn)。平行性驗(yàn)證產(chǎn)生的數(shù)據(jù)確保給定分析物在天然樣品中以類似于標(biāo)準(zhǔn)曲線的劑量依賴性方式被識(shí)別。 ELISA 回收率回收率用于確定分析物檢測(cè)是否受樣品基質(zhì)差異的影響。基質(zhì)(如血清和血漿)可能具有干擾因素,影響 ELISA 準(zhǔn)確定量分析物的能力。通過(guò)將已知量的分析物加標(biāo)到不同樣品基質(zhì)中來(lái)驗(yàn)證回收率。進(jìn)行檢測(cè)并確定回收率。通常,如果平均回收率為 80%-120%,則認(rèn)為樣品基質(zhì)對(duì)檢測(cè)準(zhǔn)確定量分析物的能力影響*小。 右表是用于報(bào)告回收率的典型格式。在該示例中, 檢測(cè)了 Invitrogen 脂聯(lián)素人 ELISA 試劑盒在 5 份不同血漿樣品中的回收率。 樣品編號(hào)平均回收率 (%)199.6299.83100.2492.5591.8 ELISA 靈敏度靈敏度定義為可與背景區(qū)分的*低分析物水平。這通常稱為分析靈敏度或檢測(cè)限。通過(guò)將零標(biāo)準(zhǔn)重復(fù)獲得的平均 O.D. 加上 2 個(gè)標(biāo)準(zhǔn)偏差來(lái)確定靈敏度。例如, Invitrogen Tau (磷酸化) [pT181] 人 ELISA KI 靈敏度 <為 10 pg/mL。這表明測(cè)試的每個(gè)試劑盒批次的靈敏度均低于 10pg/mL。用于報(bào)告 ELISA 測(cè)定靈敏度的典型規(guī)格是 " 人 Tau [pT181] <的*低檢測(cè)濃度為 10 pg/mL。這通過(guò)零標(biāo)準(zhǔn)檢測(cè) 64 次時(shí)獲得的平均 O.D. 加上兩個(gè)標(biāo)準(zhǔn)偏差來(lái)確定。ELISA 特異性進(jìn)行特異性測(cè)試以驗(yàn)證檢測(cè)到的目標(biāo)分析物與其他密切相關(guān)的分子未發(fā)生交叉反應(yīng)。交叉反應(yīng)可能導(dǎo)致假陽(yáng)性結(jié)果或不準(zhǔn)確定量。為了確保僅識(shí)別所需的分析物,對(duì)一組其他物質(zhì)進(jìn)行交叉反應(yīng)性測(cè)試。例如, 通過(guò)篩選 20 種不同物質(zhì)的交叉反應(yīng)性,對(duì) Invitrogen IL-6 小鼠 ELISA 試劑盒的特異性進(jìn)行了檢測(cè)。用于報(bào)告 ELISA 特異性結(jié)果的典型格式是 " 使用 IL-6 小鼠 ELISA 試劑盒檢測(cè)了一組 10 , 000 pg/mL 的物質(zhì)的緩沖溶液。 1β γ 檢測(cè)后發(fā)現(xiàn)無(wú)交叉反應(yīng)性:小鼠 IL-1 β , IL-2 , IL-4 , IL-10 , IFN- β , TNF- α ;大鼠 1β IL-1 β , IL-2 , IL-4 , IL-6 , IFN- γ , TNF- α ;人 IL-2 , IL-4 , IL-6 , IL-10 , IL-12 , IFN- γ , TNF- α ;豬 IL-8ELISA 質(zhì)量控制ELISA 的生產(chǎn)過(guò)程涉及高質(zhì)量生產(chǎn)標(biāo)準(zhǔn),以確保高質(zhì)量 ELISA 試劑盒的一致生產(chǎn)?;疽蛩匕ā獓?yán)格的文檔和記錄保存,人員培訓(xùn),質(zhì)量控制程序,設(shè)施和設(shè)備維護(hù),關(guān)鍵流程的驗(yàn)證,原材料控制,可追溯性,環(huán)境監(jiān)測(cè),變更控制, 和符合監(jiān)管標(biāo)準(zhǔn)。 ELISA 移液和洗滌技術(shù)技巧移液技巧1. 使用符合制造商建議范圍內(nèi)的正確移液器2. 確認(rèn)吸頭已牢固地插與移液器上3. 確認(rèn)移液時(shí)沒(méi)有氣泡4. 在每個(gè)標(biāo)準(zhǔn)品,樣品或試劑之間更換吸頭5. 每種試劑使用不同的儲(chǔ)液槽6. 將樣品吸取到孔的側(cè)面,避免飛濺7. 始終進(jìn)行樣品 / 標(biāo)準(zhǔn)品復(fù)孔設(shè)置洗滌流程1. 通過(guò)將吸頭輕輕地降低到每個(gè)孔底部,完全吸液所有孔中的液體。 備注:小心操作,不要?jiǎng)潅變?nèi)側(cè)。2. 用至少 400 μ L ?L 的洗滌緩沖液填充孔3. 浸泡 15 到 30 秒4. 從孔中吸出洗滌緩沖液5. 按照提示重復(fù)方案 (通常 3-4 次)6. 清洗完成后,翻轉(zhuǎn)孔板并在吸水組織上輕敲 (必要時(shí)用力) 干燥。確保清除所有殘留的液體。7. 或者,也可使用洗瓶或自動(dòng)洗板機(jī)。請(qǐng)務(wù)必 遵循上述內(nèi)容。 實(shí)驗(yàn)步驟1. 使用前將所有的試劑和標(biāo)本緩慢均衡至室溫(18-25oC),試劑不能直接在37oC溶解。2. 標(biāo)準(zhǔn)品(凍干品):每瓶標(biāo)準(zhǔn)品加入標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液1mL,蓋好后室溫靜置大約10分鐘,同時(shí)反復(fù)顛倒/搓動(dòng)以助溶解,其濃度為2000pg/mL。準(zhǔn)備7個(gè)稀釋標(biāo)準(zhǔn)品的EP管,每個(gè)EP管中加入150μL的標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液,如圖所示依次倍比稀釋成不同的梯度, 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液(0pg/mL)直接作為空白孔。為保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果,每次實(shí)驗(yàn)請(qǐng)使用新的標(biāo)準(zhǔn)品溶液。3. 濃洗滌液:用580mL蒸餾水或去離子水將20mL濃洗滌液稀釋至600mL,進(jìn)行30倍稀釋。 注意事項(xiàng)劑盒的儲(chǔ)存1. 未開封的試劑盒:所有試劑均按試劑瓶標(biāo)簽上所示保存。請(qǐng)注意,收到試劑盒后請(qǐng)盡快將TMB 洗滌液,終止液保存于4℃,其他試劑保存于-20℃。2. 使用后的試劑盒:剩余試劑仍需按照試劑瓶標(biāo)簽所示的溫度保存,開封后的酶標(biāo)板要加干燥劑后密封保存于-20℃,避免潮濕。 須知:試劑盒內(nèi)酶標(biāo)條可拆卸,按實(shí)驗(yàn)需求可分多次使用;使用后的剩余試劑盒建議在驗(yàn)后1個(gè)月內(nèi)使用完畢。產(chǎn)品過(guò)期時(shí)間以盒子上的標(biāo)簽為準(zhǔn),保質(zhì)期內(nèi)所有組分都確保是穩(wěn)定的。 DUMABIO ELISA檢測(cè)試劑盒公司與各大高校、醫(yī)院及權(quán)威科研單位保持著良好的合作關(guān)系,公司的產(chǎn)品質(zhì)量及服務(wù)態(tài)度得到了他們的一致認(rèn)可。篤瑪生物本著客戶至上的原則為客戶提供優(yōu)質(zhì)產(chǎn)品,公司產(chǎn)品有任何質(zhì)量的問(wèn)題免費(fèi)包退換(非人為因素造成的)。公司提供免費(fèi)代測(cè)服務(wù),并且收到樣本七個(gè)工作日出結(jié)果,確保數(shù)據(jù)的準(zhǔn)確性
Size:50ul 100ulConcentration:1mg/mlApplications:WB=1:500-2000,IHC-P=1:100-500,IHC-F=1:100-500,ICC/IF=1:100-500,IF=1:100-500,ELISA=1:5000-10000Cross Reactive Species:Human,Mouse (predicted: Rat,Rabbit,Pig,Cow,Dog)For research use only. Not intended for diagnostic or therapeutic use.Host:RabbitTarget Protein:SEMA4AIR:Immunogen Range:361-460/761Clonality:PolyclonalIsotype:IgGEntrez Gene:64218Swiss Prot:Q9H3S1Source:KLH conjugated synthetic peptide derived from human SEMA4A:361-460/761 Purification:affinity purified by Protein AStorage:0.01M TBS (pH7.4) with 1% BSA, 0.02% Proclin300 and 50% Glycerol. Shipped at 4℃. Store at -20℃ for one year. Avoid repeated freeze/thaw cycles.Background:SEMA4A belongs to the semaphorin family of soluble and transmembrane proteins. These proteins play a role in guidance of axonal migration during neuronal development and in